МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ АУТИЗМА

На сегодняшний день проведено множество работ, посвященных молекулярно-генетическим аспектам РАС, накоплено достаточно сведений, но несмотря на это, единой теории или мнения о генетических причинах их развития так и не возникло. В Казахстане данной проблемой никто не занимался, что, ввиду популяционно-генетических особенностей каждой популяции, объясняет новизну, чрезвычайную актуальность и необходимость проведения исследований в этой области отечественными учеными. Актуальность такого исследования подтверждается также активной поддержкой общественности и родителей с детьми-аутистами, которые проявили большой интерес к проведению такого исследования.

В практическом смысле такое исследование может создать научную основу для разработки и внедрения в клиническую практику новых методов ранней диагностики РАС, которые позволят определять генетическую предрасположенность к развитию РАС. Диагностирование расстройств в раннем возрасте даст возможность медикам разработать новые методы ранней терапии, которые будут более эффективны, чем в том случае, если начать лечение в возрасте двух лет, когда появляются первые симптомы и чаще всего диагностируется РАС. Все это в целом позволит оптимизировать весь комплекс медико-психологической помощи семье и ребенку, улучшить показатели социальной адаптации у детей с РАС в школьном возрасте.

В связи с вышесказанным предлагается данный проект по исследованию молекулярно-генетических факторов развития РАС.

Заявленной целью проекта является изучение молекулярно-генетических факторов развития расстройств аутистического спектра на генетическом и посттранскрипционном уровнях для идентификации молекулярных основ патогенеза и разработки методов их ранней диагностики

Для выполнения поставленной цели будет проведено генотипирование структурных изменений генов-кандидатов в семьях с детьми, которым установлен диагноз РАС и в семьях здоровых детей.

Материал для исследования представляет собой буккальный (защечный) соскоб. Соскоб сдает ребенок с РАС, его здоровые братья и сестры и родители. В связи с увеличением участников исследования, забор в некоторых регионах проводится только у детей с РАС.

Сбор материала проводится исключительно на добровольной основе и сопровождается оформлением информированного согласия по крайней мере одного из родителей на исследование себя, супруга (супруги) и своих детей.

Помимо согласия проводится заполнение анкеты и психологического теста.
Для психологического тестирования детей с 3-х лет применяется Рейтинговая шкала аутизма у детей CARS (Childhood Autism Rating Scale), которая базируется на клинических наблюдениях за поведением ребенка, требует минимального обучения в работе с этой шкалой, а также может служить для первичного скрининга симптомов аутизма. Данная шкала относится к скрининговым методам и не является основанием для постановки диагноза.

Для детей до 3-х лет применяется тест М-CHАТ, модифицированный скриннинговый тест на аутизм для детей раннего возраста. Тест доказал свою эффективность более чем в 25 странах, был апробирован в ходе масштабных исследований. M-Chat-R занимает минимум времени, может быть применен в разных условиях и не требует специального обучения. M-Chat-R является открытым тестом и распространяется бесплатно.

Из собранного материала (защечный эпителий) проводится выделение ДНК. Данная ДНК используется для генотипирования полиморфных локусов генов-кандидатов РАС с использованием таких молекулярно-генетических методов, как ПЦР-ПДРФ, ARMS и т.д.

Для статистической обработки данных проводится оценка коэффициента относительного риска по методу «соотношение шансов» (oddratio– OR) в комплексе с оценкой 95% доверительного интервала (95%CI) и «Хи-квадрат» тестом (χ²) для степени свободы=1.

rs2710102 гена CNTNAP2

rs2745557 гена COX2

rs4588 и rs7041 гена GC

rs53576 гена OXTR

rs10741657 гена CYP2R1

rs1799836 гена MAOB

Теоретические: предлагаемый проект направлен на углубление знаний о молекулярно-генетическом механизме развития РАС на генетическом и посттранскрипционном уровнях. Ожидается, что данные результаты привлекут внимание мирового научного общества по изучению факторов развития аутизма и медиков, работающих в области диагностики и терапии РАС.

Практические: известно, что в современной практике РАС диагностируются, как правило, в возрасте двух-трёх лет, что затрудняет раннее психопрофилактическое вмешательство. Такое позднее выявление объясняется как дефицитом адекватных диагностических методов, так и отсутствием знаний о механизмах развития РАС. Ожидаемые научные результаты от проекта могут быть использованы для разработки необходимых способов ранней диагностики РАС.

Для родителей ребенка с РАС результаты генетического анализа помогут понять природу генетической предрасположенности к РАС в их семье.

1. A.V. Perfilyeva, K.B. Bespalova, A.A. Garshin, L.A. Skvortsova, O.Kh.Khamdiyeva, M.O. Begmanova, B.O. Bekmanov, L.B. Djansugurova Аssociation of COX-2 gene polymorphism with autism spectrum disorder// Вестник КазНМУ РК. - 2018. - №3. - С. 87-91.
https://kaznmu.kz/press/wp-content/uploads/2018/11/ASSOCIATION-OF-COX-2-GENE-POLYMORPHISM-WITH-AUTISM-SPECTRUM-DISORDER.pdf
2. Аnastassiya Perfilyeva, Kira Jantayeva, Lilia Skvortsova, Azada Khamdieva, Bakhytzhan Bekmanov, Leyla Djansugurova Clinical-epidemiological characteristics of autism spectrum disorder in the Republic of Kazakhstan// "2nd International Conference on Neurology and Brain Disorders" June 04-06, 2018at Rome, Italy. P. 72
https://neurologycongress.com/uploads/files/4IhW8INBC_2018_Conference_Program.pdf
3. AnastassiyaV. Perfilyeva, KiraB. Bespalova, LiliyaA. Skvortsova, AsselSurdeanu, AleksandrA. Garshin, YuliyaV. Perfilyeva, OzadaKh. Khamdiyeva, Bakhytzhan O. Bekmanov, and Leyla B. Djansugurova No Association between the rs1799836 Polymorphism of the Monoamine Oxidase B Gene and the Risk of Autism Spectrum Disorders in the Kazakhstani Population // Disease Markers Volume 2019, Article ID 2846394
4. K. Bespalova, A. Perfilyeva, L. Skvortsova, A. Garshin, B. Bekmanov Association between CNTNAP2, COX2 and OXTR polymorphisms and autism spectrum disorder: a pilot case-control study in Kazakhstani population // 44th FEBS Congress, to be held 6-11 July, 2019 Krakow. https://2019.febscongress.org/abstract_preview.aspx?idAbstractEnc=4424170094095092099094424170
5.А.В. Перфильева, К.Б. Беспалова,, Л.А. Скворцова, С. Мурзатаева, А.С. Сейсенбаева, Б.О. Бекманов, Л.Б. Джансугурова Анализ ассоциации полиморфизма rs1799836 гена моноаминоксидазы В с аутизмом у женщин популяции Казахстана // Вестник КазНМУ. - 2019 №3- С.127-131